سوالات متداول (نکات ریز ولی حساس در کشت سلول) شماره اول : چگونه باید سلول های پرایمری فریز شده را ذخیره نمود ؟
1. بعد از دریافت پکیج بلافاصله سلول ها را از یخ خشک به تانک ذخیره نیتروژن منتقل کنید.
2. اگر یخ خشک در پکیج باقی نمانده باشد بلافاصله سلول ها را دفریز کرده و استفاده کنید.
3. لطفا توجه داشته باشید که ذخیره سازی سلول ها در -80 ° C می تواند باعث آسیب غیر قابل برگشت به آنها شود.
@cellculture
1. بعد از دریافت پکیج بلافاصله سلول ها را از یخ خشک به تانک ذخیره نیتروژن منتقل کنید.
2. اگر یخ خشک در پکیج باقی نمانده باشد بلافاصله سلول ها را دفریز کرده و استفاده کنید.
3. لطفا توجه داشته باشید که ذخیره سازی سلول ها در -80 ° C می تواند باعث آسیب غیر قابل برگشت به آنها شود.
@cellculture
سوالات متداول (نکات ریز ولی حساس در کشت سلول)
شماره دوم : هر چند وقت یکبار باید محیط کشت عوض شود ؟
پس از دفریز کردن و کشت سلول، اولین تعویض محیط باید 24 ساعت بعد انجام گیرد تا باقیمانده DMSO و سلول های مرده حذف شوند. پس از آن، هر 48 ساعت تعویض می شود تا سلول ها آماده پاساژ شوند. @cellculture
شماره دوم : هر چند وقت یکبار باید محیط کشت عوض شود ؟
پس از دفریز کردن و کشت سلول، اولین تعویض محیط باید 24 ساعت بعد انجام گیرد تا باقیمانده DMSO و سلول های مرده حذف شوند. پس از آن، هر 48 ساعت تعویض می شود تا سلول ها آماده پاساژ شوند. @cellculture
سوالات متداول (نکات ریز ولی حساس در کشت سلول)
شماره سوم : شرایط نگهداری و عمر مفید محیط ها و مکمل های رشد چگونه است ؟
• محیط های کشت کامل که حاوی مکمل های رشد هستند به مدت شش ماه در دمای 4 درجه پایدار هستند
• محیط های پایه بمدت یکسال در دمای 4 درجه پایدارند
• مکمل های رشد بمدت 4 روز در 4 د رجه و بمدت یکسال در فریز (20-) پایدارند.
• رسانه های پایه برای 1 سال در 4 درجه سانتی گراد پایدار است.
برای رشد بهینه سلول ها دستورالعمل های زیر را جهت نگهداری و استفاده از مواد کشت مدنظر قرار دهید :
• ویتامین های موجود در محیط های کشت به نور حساس هستند. در تاریک نگهداری شود.
• محیط کشت به هیچ وجه فریز نشود چون باعث رسوب برخی ترکیبات میشود.
• قبل از استفاده از محیط نگذارید دما آنم به 37 درجه برسد چون پایداری آن بشدت پائین می آید.
• ترجیحا، محیط های کشت را قبل از استفاده بمدت چند ساعت خارج از یخچال در دمای اتاق نگهداری کنید. @cellculture
شماره سوم : شرایط نگهداری و عمر مفید محیط ها و مکمل های رشد چگونه است ؟
• محیط های کشت کامل که حاوی مکمل های رشد هستند به مدت شش ماه در دمای 4 درجه پایدار هستند
• محیط های پایه بمدت یکسال در دمای 4 درجه پایدارند
• مکمل های رشد بمدت 4 روز در 4 د رجه و بمدت یکسال در فریز (20-) پایدارند.
• رسانه های پایه برای 1 سال در 4 درجه سانتی گراد پایدار است.
برای رشد بهینه سلول ها دستورالعمل های زیر را جهت نگهداری و استفاده از مواد کشت مدنظر قرار دهید :
• ویتامین های موجود در محیط های کشت به نور حساس هستند. در تاریک نگهداری شود.
• محیط کشت به هیچ وجه فریز نشود چون باعث رسوب برخی ترکیبات میشود.
• قبل از استفاده از محیط نگذارید دما آنم به 37 درجه برسد چون پایداری آن بشدت پائین می آید.
• ترجیحا، محیط های کشت را قبل از استفاده بمدت چند ساعت خارج از یخچال در دمای اتاق نگهداری کنید. @cellculture
سوالات متداول (نکات ریز ولی حساس در کشت سلول)
شماره چهارم : تعداد فلاسک ها یا پلیت هایی که باید برای کشت سلول استفاده شوند چگونه محاسبه می گردد ؟
معادلات زیر حداکثر تعداد ظروف مورد نیاز را مشخص می کند :
شماره چهارم : تعداد فلاسک ها یا پلیت هایی که باید برای کشت سلول استفاده شوند چگونه محاسبه می گردد ؟
معادلات زیر حداکثر تعداد ظروف مورد نیاز را مشخص می کند :
محقق گرامی شما مي توانيد سوالات خود را به شماره 09212868464 براي ما ارسال و جواب دريافت نماييد. @cellculture
سوالات متداول (نکات ریز ولی حساس در کشت سلول)
شماره پنجم : هنگام پاساژ دادن سلول چه نکات مهمی را باید مد نظر داشت ؟
همه معرف ها باید هنگام استفاده به دمای اتاق رسیده باشند. به هیچ وجه معرف ها را به دمای 37 درجه نرسانید.
تریپسیناژ نباید بیش از حد انجام گیرد. سلول ها را طی پروسه تریپسیناژ با میکروسکوپ بررسی کنید و حتما قبل از جدا شدن کامل سلول با ضربه آرام دست مرحله جداسازی را تمکیل کنید.
@cellculture
شماره پنجم : هنگام پاساژ دادن سلول چه نکات مهمی را باید مد نظر داشت ؟
همه معرف ها باید هنگام استفاده به دمای اتاق رسیده باشند. به هیچ وجه معرف ها را به دمای 37 درجه نرسانید.
تریپسیناژ نباید بیش از حد انجام گیرد. سلول ها را طی پروسه تریپسیناژ با میکروسکوپ بررسی کنید و حتما قبل از جدا شدن کامل سلول با ضربه آرام دست مرحله جداسازی را تمکیل کنید.
@cellculture
اخیرا برخی از کاربرانی که با تانک نیتروژن سر و کار دارند درخواست اطلاعاتی در مورد خطرات ناشی از گاز نیتروژن و راه های مقابله با آن را داشتند :
مرگ و میر ناشی از خفگی نیتروژن طی سالهای 1992 تا 2002 در آمریکا حدود 80 نفر بوده است.
نیتروژن به خودی خود سمی نیست. 78% از هوا نیتروزن و مابقی آن اکسیژن (میزان ناچیزی هم آرگون). زمانی که غلظت نیتروژن بیش از 84% شود فعالیت انسان غیر طبیعی شده و حتی قادر به تشخیص شرایط خظرناک نیست. در غلظت 96% نیتروژن بدلیل کاهش بیش از حد اکسیژن احتمال مرگ حتی در تنفس های کوتاه بسیار بالاست. در مورد خطرات نیتروژن بر روی بافت های بدن باید گفت : ریختن نیتروژن مایع بر روی پوست و یا تماس پوست با نیتروژن تحت فشار موجب یخ زدگی محل تماس شده و رنگ پوست بسرعت تغییر میکند. (میزان سوختگی ناشی از نیتروژن محل تماس به مدت زمان و میزان تماس بستگی دارد). گاز نیتروژن قابل اشتعال نیست و خاصیت انفجاری نیز ندارد ولی سرایت آتش و دمای بالا به مخازن نیتروزن موجب ترکیدگی آنها میشود.
@cellculture
مرگ و میر ناشی از خفگی نیتروژن طی سالهای 1992 تا 2002 در آمریکا حدود 80 نفر بوده است.
نیتروژن به خودی خود سمی نیست. 78% از هوا نیتروزن و مابقی آن اکسیژن (میزان ناچیزی هم آرگون). زمانی که غلظت نیتروژن بیش از 84% شود فعالیت انسان غیر طبیعی شده و حتی قادر به تشخیص شرایط خظرناک نیست. در غلظت 96% نیتروژن بدلیل کاهش بیش از حد اکسیژن احتمال مرگ حتی در تنفس های کوتاه بسیار بالاست. در مورد خطرات نیتروژن بر روی بافت های بدن باید گفت : ریختن نیتروژن مایع بر روی پوست و یا تماس پوست با نیتروژن تحت فشار موجب یخ زدگی محل تماس شده و رنگ پوست بسرعت تغییر میکند. (میزان سوختگی ناشی از نیتروژن محل تماس به مدت زمان و میزان تماس بستگی دارد). گاز نیتروژن قابل اشتعال نیست و خاصیت انفجاری نیز ندارد ولی سرایت آتش و دمای بالا به مخازن نیتروزن موجب ترکیدگی آنها میشود.
@cellculture
شما چه کاری میتوانید انجام دهید؟
•تخلیه نیتروژن باید در فضای آزاد و با رعایت شرایط ایمنی انجام گیرد.
•هرگز فرض نکنید که غلظت اکسیژن در فضای بسته به اندازه کافیست و همیشه قبل از کار با نیتروژن حتما باید میزان اکسیژن محل کار پایش شود و مطمئن شوید که غلظت آن از حداقل میزان ایمن کاهش نیابد، سیستم تهویه را نیز همیشه چک کنید.
•لوله های انتقال نیتروژن را بررسی کنید که نشتی نداشته باشند. و درب اصلی تانک نیز نباید بیش از حد گزارش شده توسط کمپانی سازنده نشتی داشته باشد. هنگام کار با تانک نیتروژن دستکش و عینک محافظ نیز هیچگاه فراموش نشود. @cellculture
•تخلیه نیتروژن باید در فضای آزاد و با رعایت شرایط ایمنی انجام گیرد.
•هرگز فرض نکنید که غلظت اکسیژن در فضای بسته به اندازه کافیست و همیشه قبل از کار با نیتروژن حتما باید میزان اکسیژن محل کار پایش شود و مطمئن شوید که غلظت آن از حداقل میزان ایمن کاهش نیابد، سیستم تهویه را نیز همیشه چک کنید.
•لوله های انتقال نیتروژن را بررسی کنید که نشتی نداشته باشند. و درب اصلی تانک نیز نباید بیش از حد گزارش شده توسط کمپانی سازنده نشتی داشته باشد. هنگام کار با تانک نیتروژن دستکش و عینک محافظ نیز هیچگاه فراموش نشود. @cellculture
آیا واقعا منشاء حیوان جهت تولید سرم اهمیت دارد؟ کمترین ریسک آلودگی BSE و FMD مربوط به کدام FBS می باشد؟ بله. کمترین ریسک آلودگی مخصوصا آلودگی پریون که منجر به جنون گاوی میشود مربوط به سرم ها با منشاء استرالیا و نیوزلند می باشد. @cellculture
سن گوساله در زمان جمع آوری سرم چه اهمیتی دارد؟ اصولا چرا از سنین مختلف سرم تهیه میشود؟ بطور کلی سرم تهیه شده از خون یک حیوان مسن تر ویژگی های متفاوتی نسبت به سنین کمتر دارد. ( مثلا در میزان IgG، پروتئین ها و آلبومین و . . .) ولی بسته به کاربرد آن در صنعت، درمان و تحقیقات می بایست از سنین مختلف جهت خون گیری و تولید سرم استفاده شود. در زیر سنین مختلف حیوان جهت تولید سرم را مشاهده کنید : @cellculture
محقق گرامی شما مي توانيد سوالات خود را به شماره 09212868464 براي ما ارسال و جواب دريافت نماييد. @cellculture